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      四種酵母培養基的配制
      2017-08-25

      本文主要介紹了四種酵母培養基的配制方法與原理,主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。具體如下:

      一、目的要求

      了解合成培養基、半合成培養基和天然培養基的配制原理。

      學習和掌握麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的配制方法。

      二、基本原理

      麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時也可用于培養放線菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀察形態用。麥芽汁培養基為天然培養基,馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基,而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經酸、堿調節而自然呈現的pH。

      三、實驗材料

      (一) 藥品

      葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4?7H2O,FeS04、瓊脂。

      (二) 儀器

      天平、高壓蒸汽滅菌鍋。

      (三) 玻璃器皿

      移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。

      (四) 其他物品

      藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

      四、實驗內容

      (一) 麥芽汁培養基的配制

      1.培養基成分

      新鮮麥芽汁一般為10-15波林。

      2.配制方法

      (1) 用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用。

      (2) 取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現,即表示糖化完全)。

      (3) 糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20 ml,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。

      (4) 用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4。如當地有啤酒廠,可用未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到 10-15波林后使用。

      (5) 如配固體麥芽汁培養基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水。

      (6) 分裝、加塞、包扎。

      (7) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (二) 馬鈴薯葡萄糖培養基的配制

      1.培養基成分

      馬鈴薯   20g

      葡萄糖   2 g

      瓊脂    1.5-2g

      水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 配制20%馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用。

      (2) 配制時,按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水。

      (3) 分裝、加塞、包扎。

      (4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制

      1.培養基成分

      黃豆芽   10g

      葡萄糖   5g

      瓊脂    1.5-2g

      水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補足失水,即制成10%豆芽汁。

      (2) 配制時,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水。

      (3) 分裝、加塞、包扎。

      (4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (四)察氏(czapck)培養基的配制

      1.培養基成分

      蔗糖       3g

      NaN03     0.3g

      K2HP04     0.1g

      KCl        0.05g

      MgSO4?7H2O  0.05 g

      FeS04      0.001 g

      瓊脂      1.5-2g

      蒸餾水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 稱量及溶化 量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。

      (2) 定容 候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

      (3) 加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。

      (4) 分裝、加塞、包扎。

      (5) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      注意事項:這四種培養基的配制無需用酸或者

      本文主要介紹了四種酵母培養基的配制方法與原理,主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。具體如下:

      一、目的要求

      了解合成培養基、半合成培養基和天然培養基的配制原理。

      學習和掌握麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的配制方法。

      二、基本原理

      麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時也可用于培養放線菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀察形態用。麥芽汁培養基為天然培養基,馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基,而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經酸、堿調節而自然呈現的pH。

      三、實驗材料

      (一) 藥品

      葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4?7H2O,FeS04、瓊脂。

      (二) 儀器

      天平、高壓蒸汽滅菌鍋。

      (三) 玻璃器皿

      移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。

      (四) 其他物品

      藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

      四、實驗內容

      (一) 麥芽汁培養基的配制

      1.培養基成分

      新鮮麥芽汁一般為10-15波林。

      2.配制方法

      (1) 用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用。

      (2) 取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現,即表示糖化完全)。

      (3) 糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20 ml,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。

      (4) 用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4。如當地有啤酒廠,可用未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到 10-15波林后使用。

      (5) 如配固體麥芽汁培養基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水。

      (6) 分裝、加塞、包扎。

      (7) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (二) 馬鈴薯葡萄糖培養基的配制

      1.培養基成分

      馬鈴薯   20g

      葡萄糖   2 g

      瓊脂    1.5-2g

      水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 配制20%馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用。

      (2) 配制時,按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水。

      (3) 分裝、加塞、包扎。

      (4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制

      1.培養基成分

      黃豆芽   10g

      葡萄糖   5g

      瓊脂    1.5-2g

      水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補足失水,即制成10%豆芽汁。

      (2) 配制時,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水。

      (3) 分裝、加塞、包扎。

      (4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

      (四)察氏(czapck)培養基的配制

      1.培養基成分

      蔗糖       3g

      NaN03     0.3g

      K2HP04     0.1g

      KCl        0.05g

      MgSO4?7H2O  0.05 g

      FeS04      0.001 g

      瓊脂      1.5-2g

      蒸餾水     100ml

      自然pH

      2.配制方法

      (1) 稱量及溶化 量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。

      (2) 定容 候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

      (3) 加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。

      (4) 分裝、加塞、包扎。

      (5) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

       

      注意事項:這四種培養基的配制無需用酸或者堿調節pH,滅菌20分鐘足夠了,時間過長容易把培養基成分破壞掉,太短了容易造成污染。堿調節

       

       

      pH,滅菌20分鐘足夠了,時間過長容易把培養基成分破壞掉,太短了容易造成污染。

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